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        耗材專區 EZsepTM MAX固相萃取柱應用于牛奶中碘醚柳胺殘留量的檢測

        更新時間:2024-08-23       點擊次數:1826

        前言:

        碘醚柳胺鹵化水楊酰苯胺類殺吸蟲藥,可以抑制蟲體線粒體的磷酸化過程,從而阻止蟲體內三磷酸腺甙(ATP)的合成,導致蟲體能量代謝的活力迅速減弱而死亡,隨著國內驅蟲藥的廣泛應用和研究,發現碘醚柳胺有明顯胚胎毒性,食用含有碘醚柳胺的動物性食品影響身體健康。

        本文參照《動物性食品中碘醚柳胺殘留量的測定 液相色譜-串聯質譜法(征求意見稿)》,利用EZsepTM MAX固相萃取柱(60 mg/3mL貨號:PZ12802凈化樣液,再通過高效液相色譜串聯質譜儀進行檢測,立了一種對牛奶中碘醚柳胺殘留量進行分析方法

         

        關鍵詞:

        牛奶,碘醚柳胺,固相萃取

        1 實驗過程

        1.1儀器與試劑   

        MPREP-SPE08手動固相萃取裝置,貨號:PZ0008北京萊伯帕茲檢測科技有限公司

        E.T.氮吹濃縮儀,貨號:C020017,北京萊伯帕茲檢測科技有限公司

        4500質譜系統,SCIEX公司

        EZsepTM MAX固相萃取柱(60 mg/3mL貨號:PZ12802北京萊伯帕茲檢測科技有限公司

        冷凍離心機,GL-20G-上海安亭科學儀器廠  ;  

        甲醇(色譜純),購自賽默飛世爾科技(中國)有限公司;

        乙腈(色譜純),購自賽默飛世爾科技(中國)有限公司;

        甲酸氨水三乙胺等化學品均為分析純或以上規格,購自國藥集團化學試劑有限公司

        1.2   工作液配制

        碘醚柳胺標準物質:100mg/瓶,購自壇墨質檢標準物質中心。

        碘醚柳胺標準儲備液:取碘醚柳胺標準品適量(相當于有效成分約10mg),精密稱取,用乙腈稀釋至10mL容量瓶中,配制成濃度為1000μg/mL的碘醚柳胺標準儲備液。

        碘醚柳胺標準中間液:移取碘醚柳胺標準儲備液0.1mL,用乙腈稀釋至10mL容量瓶中,配制成濃度為10μg/mL的碘醚柳胺標準中間液。

        碘醚柳胺標準使用液:碘醚柳胺標準中間液0.1mL,用乙腈稀釋至10mL容量瓶中,配制成濃度為0.1μg/mL的碘醚柳胺標準使用液。

        依次移取0.1μg/mL的碘醚柳胺標準使用液0.02、0.1、0.5、2.0、5.0mL,分別置于10mL容量瓶中用甲醇定容至刻度,得到濃度依次為0.2μg/L、1μg/L、5μg/L、20μg/L、50μg/L的標準系列工作液

        1.3 實驗部分

        1.3.1 樣品制備

         取牛奶試樣2g,置于50 mL聚丙烯離心管中,加10.0 mL 1%三乙胺乙腈溶液超聲提取10 min8000 r/min離心5 min收集上清液至另一50 mL離心管中殘渣中加入8.0 mL 1%三乙胺乙腈溶液,重復提取一次,合并兩次上清液用乙腈定容至20 mL,混勻,待凈化。

        1.3.2 固相萃取凈化 

        EZsepTM MAX固相萃取柱(60 mg/3mL貨號:PZ128025mL乙腈進行活化,取1.3.1待凈化液5.0 mL上樣,上樣結束后用5mL乙腈淋洗萃取柱再用5mL 5%甲酸乙腈洗脫萃取柱,收集洗脫液,使用E.T.氮吹濃縮儀45氮氣濃縮至近干,2.0 mL甲醇渦混勻,過微孔濾膜后供LC-MS/MS測定

        1.3.3 LC-MS/MS儀器條件

        色譜柱:Kinetex Luna PFP(2.6μm,3*100mm)

        檢測方式:多反應監測(MRM);

        流動相:A:0.1%氨水水溶液  B: 甲醇

        流速:0.3mL/min

        進樣量:5μL

         

        表1流動相梯度洗脫表

        時間/min

        流動相A/%

        流動相B/%

        0

        70

        30

        5

        0

        100

        8

        0

        100

        8.1

        70

        30

        10

        70

        30

         

        2 實驗結果

        耗材專區  EZsepTM MAX固相萃取柱應用于牛奶中碘醚柳胺殘留量的檢測 

        圖1 標液色譜圖

        耗材專區  EZsepTM MAX固相萃取柱應用于牛奶中碘醚柳胺殘留量的檢測 

        2 碘醚柳胺標準曲線

        3 結論 

        本實驗使用EZsepTM MAX固相萃取柱(60 mg/3mL貨號:PZ12802牛奶中碘醚柳胺進行凈化,通過高效液相色譜串聯質譜儀進行測定,該方法的加標回收率范圍89.6%~95.3%RSD為2.3%,能夠滿足標準要求。說明EZsepTM MAX固相萃取柱(60 mg/3mL貨號:PZ12802能很好的完成方法中的凈化工作,結果穩定、可靠。

        參考文獻

        [1] 《動物性食品中碘醚柳胺殘留量的測定 液相色譜-串聯質譜法(征求意見稿)》


         

         2   加標回收率

        加標濃度μg/kg

        回收率(%)

        均值

        RSD

        1

        2

        3

        4

        5

        6

        %

        %

        20

        91.6

        91.0

        89.9

        89.6

        90.6

        95.3

        91.3

        2.3